Topmusicanswers
En av de troliga orsakerna till flera band i PCR är ospecifik primerglödgning. ... För många PCR -cykler (mer än 30) har också potential att orsaka flera band på grund av den ökade risken för fel med varje cykel. DNA -kontaminering är en annan möjlig faktor.
- Varför finns det flera band i gelelektrofores?
- Hur felsöker du flera band i PCR?
- Vad är PCR -band?
- Varför finns det flera band i RAPD?
Varför finns det flera band i gelelektrofores?
Gelmatrisen fungerar som en sil: mindre DNA -molekyler migrerar snabbare än större, så DNA -molekyler av olika storlekar separeras i olika band under elektrofores.
Hur felsöker du flera band i PCR?
Populära svar (1)
- gör reaktionen med en negativ kontroll (ingen mall). ...
- Öka glödgningstemperaturen. ...
- Designa om primrarna och gör 3 ′ längre. ...
- Öka glödgningstiden om de icke-specifika produkterna är kortare än ditt mål. ...
- Använd mindre DNA -mall.
- Prova med touch-down PCR.
Vad är PCR -band?
Det svaga övre bandet (298 bp) identifierar en PCR -produkt som förstärks från ett enda mål i genomet. Det ljusare nedre bandet (238 bp) identifierar en multi-target PCR-produkt med 10 kopior av repetitioner i samma genom. Båda dessa målområden innehåller 100% identiska bindningsställen för primrarna.
Varför finns det flera band i RAPD?
Eftersom RAPD genereras genom slumpmässig glödgning med en 10-nukleotidprimer kan man förvänta sig att ha ett antal fragment efter varje primer som används. ... Beroende på vad du jämför (mer eller mindre genetiskt relaterat) kommer antalet polymorfa band att variera.
